大多数培养基采用孔径为0.1 ~ 0.2微米的微孔滤膜过滤灭菌，可将培养基的营养损失降低到最低限度，已成为培养基灭菌的发展方向。我配制MD培养基时，其他培养基需要121℃灭菌30分钟，因此，如果我要制备一种混合有葡萄糖的培养基，我需要对其进行灭菌和混合，其次，培养基不能浸泡在无菌水中。

1、灭菌方法培养基的灭菌方法主要有两种，高压灭菌和0.22um微孔膜过滤灭菌。高压灭菌与过滤相比，工作强度和成本较低，但容易造成营养成分的损失，在反复加样过程中容易造成二次污染(无菌谷氨酰胺溶液、无菌碳酸氢钠溶液等。).大多数培养基采用孔径为0.1 ~ 0.2微米的微孔滤膜过滤灭菌，可将培养基的营养损失降低到最低限度，已成为培养基灭菌的发展方向。

这种培养基一般不含L-谷氨酰胺和碳酸氢钠，而是将培养基高压灭菌后加入L-谷氨酰胺和碳酸氢钠的无菌液体。另外，高压谷氨酸(如L-丙氨酰L-谷氨酰胺)可以替代L-谷氨酰胺。可高压灭菌的培养基在121℃、15psi、15分钟的条件下完全可以达到灭菌效果和营养成分损失最小，且不需要延长灭菌时间。为了保证高压灭菌的效果，灭菌设备的验证非常重要。

其实很多微生物培养基都可以直接在锥形瓶中灭菌，灭菌后再装在60℃左右的培养皿中。如果非要不同个体来解释，可能有两个原因:培养微生物时，有些微生物的培养要求更高，因为要防止被支原体或衣原体感染(这些高压灭菌器不一定能消灭)，灭菌前培养皿需要用无菌水浸泡，但培养基不能用无菌水浸泡，要分开消毒。

其他培养基需要在121℃灭菌30分钟。所以如果你想把培养基和葡萄糖混合，你需要把它们混合起来使用，其次，有些培养基成分无法高温灭菌。拿我的实验来说，我配置MD培养基时，YNB(不含氨基酵母的氮源)无法高温灭菌，需要单独灭菌，希望能帮到你。