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有很多公司选择siRNA 转染试剂现在就做转染试剂。4.转染试剂有毒,4.质粒与转染试剂的比值:在一定范围内,转染效率与质粒转染试剂的比值呈正相关,但毒性也会增加,其次,siRNA转染对转染试剂细胞毒性的要求比DNA转染更严格,用于DNA转染的方法不完全适用于siRNA转染。

转染试剂

1、RNA转染实验中细胞毒性大怎么办?

RNA转染细胞毒性的可能原因如下:1 .RNA和转染试剂的比例不好。建议进行实验前优化。2.细胞密度不好。调整细胞密度。3.细胞污染。建议彻底清洗所有与细胞培养相关的物品。4.转染试剂有毒。建议选择毒性较小的非脂质体转染试剂如纳米材料用EntransterR4000试剂。

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2、影响质粒转染效率的因素有哪些?

1、质粒大小和转染量:一般情况下,转染效率随着插入片段长度的增加而降低;但转染效率在一定范围内与质粒转染量呈正相关。2.DNA质量:高质量的DNA对转染效率非常重要。如果质粒不纯,会显著影响转染复合物的形成,进而影响转染效率。因此,可以选择提取纯度较高的试剂盒来提取和纯化DNA,从而获得较高质量的DNA,提高转染效率。

转染试剂

转染实验前,应根据实验要求和细胞特性选择合适的转染试剂。比如在转染绵羊成纤维细胞的过程中,FuGeneHD的转染效率更高,GenEscortTMI对小鼠胶质细胞的转染效果更好。总之,筛选可以遵循高效低毒的原则。4.质粒与转染试剂的比值:在一定范围内,转染效率与质粒转染试剂的比值呈正相关,但毒性也会增加。可根据转染试剂的推荐比例确定合适的转染比例。

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3、脂质体转染原理

1定义编辑起初,人们只是用脂质体模拟生物膜,研究膜的结构和功能,从而发现膜的融合和内吞作用,因此可以作为外来物质进入细胞的载体。2特征编辑阳离子脂质体表面带正电荷,可通过静电作用将DNA分子与核酸的磷酸根包裹在一起,形成DNA-脂质复合物,也可被带负电荷的细胞膜所吸附。然后通过膜融合或细胞内吞,偶尔通过直接渗透,将DNA转入细胞内形成包涵体或溶酶体,小部分DNA可从包涵体中释放出来,进入细胞质,进一步进入细胞核转录表达。

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引起基因表达上调或下调。如参与PKC(蛋白激酶C)通路的调节(biochemistry . 1992 sep 22;31(37):902530);例如,抑制ATP酶的活性(BiochimBiophysActa.2008Apr1777(4):3628);例如,它与线粒体膜相互作用(jbiolchem . 1989 Jan 25;264(3):150815);转染siRNA引起脱靶效应等等。

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4、siRNA转染和DNA转染有什么区别?

首先,siRNA比DNA的数万个碱基对要小得多,因为它只有二十个碱基对。目前转染试剂大部分是针对比较大的质粒DNA,而不是小RNA分子。用于DNA转染的方法不完全适用于siRNA转染。其次,siRNA转染对转染试剂细胞毒性的要求比DNA转染更严格。因为转染试剂对细胞的毒性往往是许多基因直接或间接上调或下调的结果,有些实验对过表达的DNA转染影响不大,但对以研究基因干扰为主要目的的RNAi实验来说是致命的,因为细胞死亡和RNAi实验造成的结果在现象上是一致的,轻微的会影响实验数据,严重的会改变实验结果。

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5、转染的分类

包含:1。DEAE葡聚糖法DEAE葡聚糖是哺乳动物细胞中最早的应用之一转染试剂。DEAE葡聚糖是一种阳离子聚合物,与带负电荷的核酸结合后被吸附在细胞膜附近。DEAE葡聚糖转染已经成功地应用于瞬时表达的研究,但是对于稳定转染不是很可靠。2.磷酸钙法磷酸钙共沉淀转染法由于试剂易得且廉价,在瞬时转染和稳定转染的研究中被广泛使用。先将DNA与氯化钙混合,然后加入到PBS中,慢慢形成DNA磷酸钙沉淀。最后,将含有沉淀的悬浮液加入到培养的细胞中,通过细胞膜的胞吞作用摄取DNA。

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人工脂质体法采用阳离子脂质体,转染效率高。它不仅可以转染其他化学方法难以转染的细胞系,还可以转染从寡核苷酸到人工酵母染色体的不同长度的DNA,以及RNA和蛋白质。此外,脂质体体外转染既适用于瞬时表达,也适用于稳定表达。与以往不同的是,脂质体还可以介导将DNA和RNA转移到动物和人体内进行基因治疗。

6、什么品牌 转染试剂可以转染BMDM细胞(小鼠骨髓来源巨噬细胞

bmdm:Bonemarrowdrivedmacrophage是一种常见的初级巨噬细胞,常用于炎症细胞模型。用siRNA或质粒DNA转染BMDM小鼠的原代骨髓来源的巨噬细胞非常困难,2020年1月,西南医科大学中西医结合医院用ZetaLife公司的高级转染试剂转染试剂,文章编号AD,成功转染BMDM小鼠骨髓来源的巨噬细胞,并发表文章。文章的标题是《黄芪多糖(a。